本文標題：" 細胞內活性氧物質測定法-生物顯微鏡專業門市"
發布者：yiyi ------ 分類: 站內動態 ------ 人瀏覽過 -----時間：2012-11-12 15:50:24
細胞內活性氧物質測定法-生物顯微鏡專業門市
細胞內活性氧物質（intracellular reactive oxygen species; ROS）之測定法
一、原理
H2DCF-DA 是一種染劑對過氧化氫（H2O2）相當敏感，可用來偵測細
胞內產生的過氧化物質。H2DCF-DA 為不具螢光的物質，加至培養液中可經
由擴散作用通過細胞膜進入細胞內；而細胞內的酵素酯醣（esterase）會對
H2DCF-DA 進行去乙醯化作用（deacetylation），進而形成極性的化合物
（H2DCF），因為 H2DCF 無法穿透細胞膜并被留在細胞內；由于其不具螢光
的特性，但當細胞內有過氧化物質存在時，會使 H2DCF 氧化而成為具有螢
光的產物（DCF）。當細胞內活性氧物質產生量越多，H2DCF 被氧化成帶螢
光的產物（DCF）相對提高；故，利用偵測 DCF 螢光強度即可得知細胞內
活性氧物質產生之多寡
并以相對螢光單位（relative fluorescent unit, rfu）為計量單位，表示細胞內活性氧物質的相對含量
二、螢光染劑：2,7-dichloridihydrofluorescein（H2DCF-DA）: Sigma/molecular probe
三、實驗步驟
1. 移除 24 孔盤中的培養液，再加入 500μl 新的培養液。
2. 每孔加入濃度為 20 mM 的 H2DCF-DA，隨即將 24 孔盤置于細胞螢光測
定儀上（cytofluormetry）；設定激發（excitation）波長為 485 nm，發散
（emission）波長為 530；每三分鐘測讀一次，共計三十分鐘
后一篇文章： 對應黃條葉蚤誘引的辦法-生物百科 »
前一篇文章：« 脫殼、碾白之米粒常在乾燥、碾磨過程中的問題
tags:實驗,生物顯微鏡,精密儀器,
細胞內活性氧物質測定法-生物顯微鏡專業門市,熒光顯微鏡現貨供應
本頁地址：http://www.tyjm.com.cn/wz/320.html轉載注明
本站地址：http://www.tyjm.com.cn/
http://www.xianweijing.org/
資訊中心：
延伸閱讀
- β-淀粉酶可制造麥芽糖，故又名醣化酵素(2012-11-11 17:32:54)
- 觀察顯微鏡下細胞質的-專業生物顯微鏡公司(2012-11-8 23:14:34)
- 分析儀器種類介紹！專業實驗室設備常識(2012-11-4 23:27:29)
- 微生物可依其生長時對于氧氣的需求性不同而分為3大類(2012-11-3 5:5:55)